Borelioza, IgM w surowicy i PMR, met. Immunoblot

Wykonane metodą immunoblotu (pochodną techniki Western blot) badanie potwierdzające  dodatni (i/lub graniczny) wynik identyfikujący  w surowicy krwi i płynie mózgowo-rdzeniowym (PMR) przeciwciała IgM specyficzne dla antygenów krętków rodzaju Borrelia. Test  jest stosowany w serologicznej diagnostyce boreliozy przy podejrzeniu neuroboreliozy.  Neuroborelioza jest postacią boreliozy, w której zaatakowany został centralny lub obwodowy układu nerwowego. W Polsce neuroborelioza częstością ustępuje jedynie postaci skórnej. Predyspozycję do zajęcia układu nerwowego z kompleksu Borrelia burgdorferi sensu lato wykazuje Borrelia garinii. Liczba przypadków neuroboreliozy jest trudna do określenia,  ponieważ wszystkie postaci boreliozy określane są wspólnym kodem ICD jako ICD-10. Metoda immunoblot zastosowana w serodiagnostyce boreliozy ma na celu wykazanie w surowicy obecności przeciwciał reagujących z określonymi, dokładnie scharakteryzowanymi biochemicznie, antygenami krętka o potwierdzonej swoistości gatunkowej (gatunkowospecyficznymi). Zasada testu nawiązuje do techniki Western Blot, wykorzystywanej w produkcji zestawu. Test służy do weryfikacji wyników dodatnich i granicznych uzyskiwanych we wstępnym etapie diagnostyce testami ELISA.
Ze względu na istnienie kilku gatunków krętków z rodzaju Borrelia stanowiących patogeny boreliozy istotne w Europie (m.in. B. burgdorferi, B. afzelii, B. garinii, B. spielmanii, etc.) blot powinien uwzględniać antygeny reprezentatywne –  optymalnie, dla każdego z nich lub, przynajmniej, dla gatunków najbardziej istotnych w regonie. Przy doborze antygenów należy uwzględniać również ich ekspresję w możliwie  największej liczbie etapów choroby. Składniki antygenów krętka uzyskiwane są metodami inżynierii białek (antygeny rekombinantowe) lub metodą izolacji i oczyszczania z komórek bakteryjnych. Wynik blotu odczytywany jest na podstawie algorytmów uwzględniających istotność diagnostyczną przeciwciał swoistych dla określonych antygenów lub/i nasilenie reakcji indykatorowej wykrywającej ich obecność. W przypadku antygenów o najwyższej specyficzności dla rodzaju i genogatunku krętka, pojedynczy wynik pozytywny jest diagnostycznie równie mocny jak wyniki pozytywne lub graniczne dla kilku antygenów słabszych diagnostycznie.
W surowicy oznaczane są przeciwciała specyficzne dla:  rekombinowanego  antygenu VlsE B. burgdorferi (VlsE B.b); rekombinowanej flageliny p41, p39 (BmpA)  z Borrelia afzelii lub Borrelia burgdorferi; oczyszczonych, natywnych antygenów OspC-adv (p25) z Borrelia afzeli ( B.a), Borrelia burgdorferi ( B.b ), Borrelia garinii ( B.g).
W PMR oznaczane są przeciwciała specyficzne dla: rekombinowanego  antygenu  VlsE B. burgdorferii (VlsE B. b); rekombinowanej flageliny p41; p39(BmpA) z Borrelia afzelii lub Borrelia burgdorferii; oczyszczonych, natywnych antygenów OspC (p25) z Borrelia afzeli (OspC B.a), Borrelia burgdorferi (OspC B.b ), Borrelia garinii (OspC B.g).