Pakiet alergenów pszczoły (Api m 1, Api m 2, Api m 3, Api m 5, Api m 10), met.ImmunoCAP.

Alergia na jad pszczeli powoduje ciężką, niekiedy śmiertelną reakcję anafilaktyczną. Ustalenie molekularnych alergenów jadu odpowiedzialnych za uczulenie pierwotne oraz reaktywność krzyżową umożliwia wskazanie uczulenia pierwotnego, wdrożenie swoistej immunoterapii alergii, mającej na celu wytworzenie tolerancji na uczulające składniki jadu, wskazanie możliwego obrazu klinicznego i profilaktyki.
Molekularna diagnostyka alergii opiera się na wskazaniu molekularnych komponent ekstraktu źródła alergenu odpowiedzialnych za uczulenie. Identyfikacja dokonywana jest na podstawie pomiaru stężenia IgE specyficznej dla istotnych alergenów molekularnych (sIgE).  Wzrost stężenia sIgE jest proporcjonalny do nasilenia alergii. Znajomość właściwości alergenów molekularnych wskazanych przez pomiar sIgE pozwala na: ustalenie rodzaju i rozległości reakcji alergicznych, sposobu ograniczania potencjału uczulającego (np. przez obróbkę cieplną w przypadku alergenów pokarmowych), zasadności wdrażania specyficznej immunoterapii oraz na ustalenie reaktywności krzyżowej z homologicznymi alergenami molekularnymi z innych źródeł oraz cząsteczkami zawierającymi węglowodanowe komponenty – CCD (ang. cross-reacting carbohydrate determinants). Identyfikacja sIgE dla pozbawionych CCD, rekombinantowych alergenów jadu pszczoły: Api m 1, Api m 3, Api m 4 i Api m 10 pozwala na wykazanie pierwotnego, swoistego uczulenia na jad pszczoły miodnej oraz na różnicowanie pierwotnego uczulenia na jad pszczoły i os. Na podstawie profilu sIgE osób uczulonych na jad pszczeli ustalono, że  alergenami najczęściej  uczulającymi (głównymi) jadu pszczelego są: Api m 1, Api m 2, Api m 3, Api m 5 i Api m 10. Specyficzne dla nich IgE jest obecne u ponad 50% uczulonych. Wykazano, że identyfikacja sIgE dla poszczególnych markerów molekularnych pierwotnego uczulenia, w tym gatunkowo-specyficznych alergenów głównych jadu, poprawia specyficzność testu w porównaniu do oznaczeń sIgE wykonywanych z wykorzystaniem pełnego ekstraktu alergenów jadu. Maksymalna czułość diagnostyczna testu in vitro w kierunku uczulenia na jad pszczeli uzyskiwana jest z uwzględnieniem alergenów: Api m 3, Api m 4, Api m 10; maksymalna  specyficzność w przypadku uwzględnienia gatunkowo-specyficznych: Api m 1, Api m 3, Api m 4, Api m 10.  Wykazano, że 74% osób z alergią uczulonych jest na więcej niż jeden alergen. Uwzględnienie sIgE dla 6 alergenów molekularnych: Api m 1-5, 10, pozwala na osiągnięcie czułości diagnostycznej 95%.
Api m 1 – gatunkowo specyficzny alergen główny jadu pszczoły, biochemicznie fosfolipaza o ciężarze 16 dDa, silnie glikozylowana – tzn. zawierająca  CCD. Przeciwciała swoiste dla Api m 1 są obecne u 57-97% osób uczulonych na jad pszczeli.
Api m 2 – alergen główny jadu pszczoły, glikozylowana hialuronidaza o ciężarze 45 dDa, zawierająca CCD i przez to wykazująca reaktywność krzyżową z alergenem jadu osy, Ves v 2, posiadającym identyczne reszty CCD. Przeciwciała swoiste dla Api m 2 są obecne u 46 -52% osób z alergią na jad pszczeli.
Api m 3 – gatunkowo specyficzny alergen główny jadu pszczoły, glikozylowana kwaśna fosfataza o ciężarze 49 kDa, zawierająca CCD. Przeciwciała swoiste dla Api m 3 są obecne u 50% osób z alergią na jad pszczeli. Wg innych badań 68% uczulonych na jad pszczoły posiada sIgE dla  Api m 3 i Api m 10, podczas gdy, mniej niż 5% jest uczulonych na te alergeny pojedynczo, co jest istotne przy wyborze preparatu do swoistej immunoterapii.
Api m 5 – gatunkowo specyficzny alergen główny jadu pszczoły, glikozylowana dipeptydylopeptydazą IV, o ciężarze 100 dDa, zawierającą CCD. Przeciwciała swoiste dla Api m 5 są obecne u 58-60% osób z alergią na jad pszczeli.
Api m 10 – gatunkowo specyficzny alergen główny jadu pszczoły, wysoko glikozylowana ikarpina, bogata w  CCD. Oznaczenie sIgE dla Api m 10 zwiększa zarówno czułość oznaczenia oraz specyficzność/selektywność rozpoznania alergii. sIgE dla Api m 10 są obecne u 51.5-62% osób z alergią na jad pszczeli. Istotne jest, że 68% uczulonych wykazuje reaktywność sIgE na oba, Api m 3 i Api m 10, a jedynie mniej niż 5% jest uczulonych na te alergeny pojedynczo, co staje się istotne w przypadku wyboru preparatu do swoistej immunoterapii. We wszystkich testach pakietu wykorzystano cząsteczki alergenów wytworzone na drodze inżynierii genetycznej (rApi m 1, rApi m 2 etc).